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以下是雞極低密度脂蛋白(VLDL)ELISA試劑盒的實驗使用說明書綜合整理:
BS-7303 雞極低密度脂蛋白(VLDL)ELISA試劑盒
一、實驗原理?
采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。通過預包被抗體的微孔板捕獲樣本中的VLDL,加入酶標記檢測抗體后形成復合物,經(jīng)底物顯色(TMB顯藍色,酸化后轉(zhuǎn)黃色),顏色深淺與VLDL濃度成正比。
二、試劑盒組成?
預包被板條?:96孔或48孔配置(含空白對照孔)
標準品?:24ng/ml(需按說明書稀釋)
酶標抗體?:HRP標記的檢測抗體
底物(A/B液)?:TMB顯色液
終止液?:酸性溶液
洗滌液?:需稀釋的濃縮液
三、操作步驟?
樣本準備?
血清/血漿樣本需離心去除顆粒物,建議1:1稀釋后使用。
標準品與樣本加樣?
標準品孔:加入不同濃度標準品50μL。
樣本孔:加入待測樣本50μL,空白孔不加。
孵育與洗滌?
加入酶標抗體100μL,37℃孵育60分鐘。
洗滌5次(每孔加洗滌液350μL,靜置1分鐘后拍干)。
顯色與終止?
每孔加底物A/B各50μL,37℃避光孵育15分鐘。
加入終止液50μL,5秒內(nèi)搖勻。
檢測?
酶標儀450nm波長測定OD值。
四、注意事項?
保存條件?:試劑盒2-8℃保存,頻繁使用時避免反復凍融。
交叉污染?:使用一次性吸頭,避免金屬部分接觸終止液/底物。
洗滌要求?:充分拍干微孔板,避免殘留液體影響結(jié)果。
數(shù)據(jù)有效性?:標準品線性回歸R值需≥0.9900,批內(nèi)變異系數(shù)<15%。
五、技術(shù)參數(shù)?
檢測范圍?:10–320 μmol/L(不同品牌可能差異)。
靈敏度?:檢測濃度<1.0 ng/L。
有效期?:6個月(2-8℃保存)。
注:以上僅供參考,如需具體品牌試劑盒的差異說明,可進一步補充信息。
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